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    上海帛科生物技術有限公司
       
       
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    Mach1-T1 感受態(tài)細胞
    起訂量 (瓶)價格
    1-102350 /瓶
    ≥101250 /瓶
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
    • 貨號:BK-G63219
    • 發(fā)布日期: 2021-02-21
    • 更新日期: 2025-08-06
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
    保存條件 低溫冷藏
    品牌 帛科
    貨號 BK-G63219
    用途 產(chǎn)品僅用于科研
    組織來源 詳見說明書
    細胞形態(tài) 詳見說明書
    是否是腫瘤細胞
    CAS編號
    保質期 詳見說明書
    器官來源 詳見說明書
    免疫類型 詳見說明書
    品系 詳見說明書
    生長狀態(tài) 詳見說明書
    物種來源 詳見說明書
    包裝規(guī)格 100ul*20 100ul*100
    純度 %
    是否進口
    規(guī)格參數(shù):

    產(chǎn)品名稱:Mach1-T1 感受態(tài)細胞
    規(guī)格 :100ul*20 100ul*100
    分類:克隆感受態(tài)細胞
    用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
    儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
    外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
    單位: 袋

    細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
    1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
    2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    注意事項:
    1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
    2. 混入質粒或連接產(chǎn)物時應輕柔操作。
    3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。
    同一批感受態(tài)細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
    答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
    感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
    答:如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。
    操作方法:
    1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
    2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
    3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
    4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

    5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

    左旋舒必利(標準品)Levosulpiride質量規(guī)格:>98%,標準品  AMCA蛋白標記試劑盒3(200微克/)  粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒 ,英文名: MEC/CCL28 ELISA Kit

    左旋舒必利Levosulpiride質量規(guī)格:>98%,BR  MouseHaptoglobin,Hpt/HPELISA試劑盒小鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    拉莫三嗪 (標準品)Lamotrigine質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品  小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  ELISAKitTPO小鼠甲狀腺過氧化物酶規(guī)格:48T/96T

    D-半乳糖醛酸D-Galacturonic acid質量規(guī)格:進分,97%,一水  Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒  HumanAndrostenedioneASDELISAKit人雄烯二同(ASD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    RatFactor-relatedApoptosis,FASELISA試劑盒大鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  117047-07-1別名:品牌  3’-Methoxy Puerarin

    小鼠組織型纖溶酶原激活因子(tPA)ELISA試劑盒 ,英文名: tPA ELISA Kit  23445-00-3當藥醇苷規(guī)格  Swertianolin  

    鴨白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T  2469-34-3遠志皂苷元  Senegenin

    犬抑制素β-B(Inhbb)試劑盒 Canine inhibin beta-B,Inhbb ELISA Kit  7518-22-1楤木皂苷A說明書  Cantleyoside

    英文名稱MouseBTCELISAKit小鼠BTCELISAKit規(guī)格:96T/48T  吳茱萸苷品牌  Cantleyoside

    去甲斑蝥酸鈉品牌   Demethylcantharidate   組織溶酶體型酸性1酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒20

    Mach1-T1 感受態(tài)細胞青陽參苷元B  Qingyangshengenin B   組織人體腺病毒(adenovirus)定性檢測試劑盒20

    青陽參苷元A說明書  Qingyangshengenin A   組織人體腺病毒(adenovirus)定量PCR擴增檢測試劑盒20

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    千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷說明書   Oroxylin A 7-O-glucuronide   組織人體鼻病毒(rhinovirus))定性檢測試劑盒20

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