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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    TOP10 感受態(tài)細胞
    起訂量 (瓶)價格
    1-102350 /瓶
    ≥101250 /瓶
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
    • 貨號:BK-G63216
    • 發(fā)布日期: 2021-02-21
    • 更新日期: 2025-08-06
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
    保存條件 低溫冷藏
    品牌 帛科
    貨號 BK-G63216
    用途 產(chǎn)品僅用于科研
    組織來源 詳見說明書
    細胞形態(tài) 詳見說明書
    是否是腫瘤細胞
    CAS編號
    保質(zhì)期 詳見說明書
    器官來源 詳見說明書
    免疫類型 詳見說明書
    品系 詳見說明書
    生長狀態(tài) 詳見說明書
    物種來源 詳見說明書
    包裝規(guī)格 100ul*20 100ul*100
    純度 %
    是否進口

    細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
    1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
    2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

    規(guī)格參數(shù):

    產(chǎn)品名稱:TOP10 感受態(tài)細胞
    規(guī)格 :100ul*20 100ul*100
    分類:克隆感受態(tài)細胞
    用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
    儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
    外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
    單位: 袋

    注意事項:


    1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
    2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
    3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
    同一批感受態(tài)細胞,用含目的片段的T載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化,卻一個菌都沒長出來,重復(fù)了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關(guān),還是連接出了問題?哪個可能性大些?
    答:應(yīng)該是連接的問題。所有連接反應(yīng)建議同時轉(zhuǎn)化酶切后的質(zhì)粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質(zhì)粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
    感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉(zhuǎn)化質(zhì)粒嗎?
    答:如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況,是可以用來轉(zhuǎn)化的,但是由于凍存時間過長,轉(zhuǎn)化效率會有所下降,如果用于普通的質(zhì)粒重轉(zhuǎn)或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。

    左氧氟沙星(標準品)Levofloxacin Hemihidrated質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品  Humanheparansulfate,HSELISAKit 人硫酸類肝素(HS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  人凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    四氫生物蝶呤(THB)二鹽酸Tetrahydrobiopterin (THB) di質(zhì)量規(guī)格:美國進口  Cheraxquadricarinatuslipovitellin/vitellin,Lv/VnELISA試劑盒紅螯光殼螯蝦卵黃脂1蛋白/卵黃1蛋白(Lv/Vn)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  小鼠細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒 Mouse iercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit

    鹽酸決奈達隆Dronedarone HCl質(zhì)量規(guī)格:美國進口  原生質(zhì)酵母細胞轉(zhuǎn)化試劑盒20  C組輪狀病毒(HRV-C)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    鹽酸決奈達隆-d6Dronedarone-d6 HCl質(zhì)量規(guī)格:美國進口  MouseIgMELISAKit小鼠IgMELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  HumanSerumamyloidP,SAPELISA試劑盒人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    人抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒 Human ai-Monocyte aibody,AMA ELISA Kit  27215-14-1新穿心蓮內(nèi)酯規(guī)格  Neoandrographolide  

    RabbitThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit兔素B2(TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  43043-74-9去氧紫草素  Deoxyshikonin  

    載玻片細胞CDK3蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  29782-68-1水飛薊寧說明書  Silydianin  

    Humanα-Synuclein,α-SYNELISA試劑盒人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  24063-71-6異莪術(shù)烯醇品牌  Isocurcumenol  

    小鼠組織因子通道抑制因子(TFPI)ELISA試劑盒 ,英文名: TFPI ELISA Kit  952068-64-3巴利森苷D規(guī)格  Parishin D

    塔拉薩敏  talatisamine  組織腎素(renin)熒光共振能量轉(zhuǎn)移法(FRET)定量檢測試劑盒20

    薯蕷皂苷元-3-O-β-D-木糖-(1→3)-β-D-葡萄糖苷品牌  diosgenin-3-O-β-D-xylosyl-(1→3)-β-glucoside   組織腎素(renin)活性熒光定量檢測試劑盒20

    山麥冬皂苷B品牌  Liriopesides B  組織砷元素比色法定量檢測試劑盒20

    TOP10 感受態(tài)細胞三七總皂苷規(guī)格  Panax notoginsenosides   組織傷寒沙門氏菌(SalmonellaTyphi)定性試劑盒20

    三七皂苷R2(R)  R-Notoginsenoside R2   組織傷寒沙門氏菌(SalmonellaTyphi)定量PCR擴增檢測試劑盒20

    操作方法:

    1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
    2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
    3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
    4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

    5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

    聯(lián)系方式
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