技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：

1. 特異性：核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。

3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

反應五要素：

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

檸檬酸三甲酯(>98.0%(GC))  Trimethyl   質量規格：>98.0%(GC) 英文名稱HumanCINC-2a/bELISAKit人CINC-2a/b規格：96T/48T

檸檬酸三丙酯(>97.0%(T))  Tripropyl   質量規格：>97.0%(T) 英文名稱HumanCINC-3ELISAKit人CINC-3規格：96T/48T

N-丁基苯磺酰胺(>98.0%(HPLC)(N))  N-Butylbenzenesulfonamide  質量規格：>98.0%(HPLC)(N) 英文名稱HumanCKMBELISAKit人激動異構酶MB(CKMB)規格：96T/48T

D-(+)-樟腦(>98.0%(GC))  (+)-Camphor  質量規格：>98.0%(GC) 英文名稱HumanCoicoseroneELISAKit人皮質同(Coicoserone)規格：96T/48T

阿卡波糖十三醋酸酯  Acarbose Tridecaacetate   質量規格：美國進口 英文名稱HumanCoisolELISAKit人皮質醇(Coisol)ELISAKit規格：96T/48T

阿昔洛韋鈉鹽  Acyclovir    質量規格：美國進口 英文名稱HumanCollageypeIELISAKit人I型膠原(CollageypeI)規格：96T/48T

阿昔洛韋單鹽  Acyclovir Monophosphate   質量規格：美國進口 英文名稱HumanCollageypeIIELISAKit人II型膠原(CollageypeII)ELISAKit規格：96T/48T

阿昔洛韋-d4  Acyclovir-d4   質量規格：美國進口 英文名稱HumanCollageypeIIIELISAKIT人III型膠原(Collagen)ELISAKIT規格：96T/48T

N2-乙?；?/span>-9-（2-乙酰氧基乙氧基甲基）鳥嘌呤（阿昔洛韋雜質）  N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)  質量規格：美國進口 英文名稱HumanconnectivetissuegrowthfactorELISAKit人結締組織生長因子(ctgf)ELISA試劑盒規格：96T/48T

腺苷3′,5′-環單硫代酯，8-氯-,Rp-異構體鈉鹽  Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate, 8-Chloro-, Rp-Isomer,  Salt   質量規格：美國進口 英文名稱HumanCPAFELISAKIT人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規格：96T/48T
兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit     Acetophenone tosylhydrazone  中文名：苯乙酮對甲苯磺酰基腙  分子式：C15H16N2O2S  度：98.0%

核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  中文名：  分子式：C12H7ClOS  度：%

兔子纖溶酶原elisa試劑盒   兔子纖溶酶原試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子纖溶酶原試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子纖溶酶原試劑盒、兔子纖溶酶原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Arbidol hydrochloride  131707-23-8  中文名：鹽酸阿比朵爾  分子式：C22H26BrClN2O3S