技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：黃頭病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Chrysophanol  481-74-3  中文名：大黃酚  分子式：C15H10O4    Humandopaminedecarboxylase,DDCELISA試劑盒人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Chrysophanol 8-O-glucoside  13241-28-6  中文名：  分子式：C21H20O9    組織NEK6激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Rubanthrone A  441764-20-1  中文名：  分子式：C17H14O10    HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Aloin  8015-61-0  中文名：蘆薈苷  分子式：C21H22O9    兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Aurantio-obtusin  67979-25-3  中文名：橙黃決明素  分子式：C17H14O7    People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒E
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Bindone  中文名：雙茚二酮  分子式：C18H10O3  度：98.0%

小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane  105391-33-1  中文名：雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來(lái)基苯基)甲烷  分子式：C27H26N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠α2抗纖溶酶elisa試劑盒   小鼠α2抗纖溶酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠α2抗纖溶酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α2抗纖溶酶試劑盒、小鼠α2抗纖溶酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Bindone  1707-95-5  中文名：雙茚二酮  分子式：C18H10O3  度：98.0%   

小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Bi-linderone  1227375-09-8  中文名：  分子式：C34H32O10  度：96.5%  關(guān)鍵詞：  山胡椒屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠α1微球蛋白elisa試劑盒   小鼠α1微球蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠α1微球蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α1微球蛋白試劑盒、小鼠α1微球蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Enrofloxacin  93106-60-6  中文名：恩諾沙星  分子式：C19H22FN3O3  度：98.0%
黃頭病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6aR,11aR）3-羥基-9，10-二甲氧基紫檀烷質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan

間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基MCDM千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Oroxyloside

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3 細(xì)胞，Hela細(xì)胞 HEL299(紅白細(xì)胞細(xì)胞)甲殼素；幾丁質(zhì)質(zhì)量規(guī)格：BRChitin

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0910輔酶 A質(zhì)量規(guī)格：>85%,BRCoenzyme A, free acid, hydrate (COA)

MESDC2 Others Human 人 MESDC2 / MESD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 多效唑質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPaclobutrazol
NRL1 化大家鼠肺成纖維樣細(xì)胞阿糖腺苷一水物質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Vidarabine Monohydrate

大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1鹽酸倍他司汀-d3質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Betahistine-d3 Dihydrochloride

Ishikawa, 人細(xì)胞系倍他司汀一鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Betahistine Hydrochloride

人細(xì)胞;SF767 大鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL倍他司汀-d3質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口β-Histine-d3

腎系膜細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MCGS阿卡地新(AICAR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAcadesine