【產品名稱】: 黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Yellow Fever Virus(YFV)RTPCR
【貨號】: BKP4550

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

Cholesterol  57-88-5  中文名：膽固醇  分子式：C27H46O  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorpheniramine maleate  113-92-8  中文名：馬來酸氯苯那敏  分子式：C20H23ClN2O4  度：98.0%      小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorotetracycline  57-62-5  中文名：金霉素  分子式：C22H23ClN2O8  度：98.0%      小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Chlorogenic acid  327-97-9  中文名：綠原酸  分子式：C16H18O9  度：98.0%  關鍵詞：  *; 抗氧化; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠凝血因子Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Chlorhexidine acetate  56-95-1  中文名：醋酸氯己定  分子式：C26H38Cl2N10O4  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Bi-linderone  1227375-09-8  中文名：  分子式：C34H32O10 

小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate  147118-35-2  中文名：  分子式：C31H39O4PSi  度：98.0%  關鍵詞： 

小鼠α1酸性糖蛋白elisa試劑盒   小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒、小鼠α1酸性糖蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Bindone  1707-95-5  中文名：雙茚二酮  分子式：C18H10O3 

小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Bezafibrate  中文名：苯扎貝特  分子式：C19H20ClNO4  度：98.0%

小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Estradiol heptanoate  4956-37-0  中文名：庚酸雌二醇  分子式：C25H36O3
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三苯甲基羧酸洛沙坦質量規格：美國進口N-Trityl Losartan Carboxylic Acid

CL-0270CRT(人神經細胞)5×106cells/瓶×2O-乙酰洛沙坦質量規格：美國進口O-Acetyl Losartan

KB-C1.5細胞，細胞 人T瘤轉基因細胞,Jurkat D,E細胞 人上皮細胞;Hep-2洛沙坦N2-葡萄糖苷酸質量規格：美國進口Losartan N2-Glucuronide

769-P(人腎細胞腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2洛沙坦質量規格：美國進口Losartan

ACVRL1 Others Rat 大鼠 ALK-1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 洛匹那韋代謝產物M-3/M-4質量規格：美國進口Lopinavir Metabolite M-3/M-4
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書MIApaca-2細胞，人細胞 人成纖維細胞,HT1080細胞 615小鼠瘤株;HP615DCCIN，N-二環己基碳1克AR，99%

HuH-6(人肝母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2流醋鈰;流醋鈰銨 CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1094-4-2

Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內皮細胞生長培養基(即用型) 500ml2,5-二本惡唑shēng huà shì jì容量：500毫升

人骨骼肌細胞裂解物HSkMCLAMMONIUMOXALATEMONOHYDRATE草酸*500G6009-70-7RT

PRKCD Others Mouse 小鼠 PKC delta / PRKCD 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (8-羥基)
PCR檢測試劑盒

黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。