PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：單胞菌通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic   中文名：  分子式：C13H16O5  度：98.0%  豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒、豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Repaglinide  中文名：瑞格列奈  分子式：Repaglinide  度：98.0%  兔子脫氫表雄酯elisa試劑盒   兔子脫氫表雄酯試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子脫氫表雄酯試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子脫氫表雄酯試劑盒、兔子脫氫表雄酯eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

3-Amino-2,6ione   中文名：  分子式：C5H9ClN2O2  度：98.0%  細(xì)胞毒 T 細(xì)胞相關(guān)抗原 4(CTLA-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate  中文名：  分子式：Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate  度：98.0%  結(jié)締組織生長(zhǎng)因子 (CTGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Ezetimibe  中文名：依澤替米貝  分子式：C24H21F2NO3  度：98.0%  心肌營(yíng)養(yǎng)素 -1(CT-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
人維生素D(VD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              中文名：  分子式：C29H39N5O8 

人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              2-Benzothiazolol  中文名：2-羥基苯并噻唑  分子式：C7H5NOS 

人突觸足蛋白(SYNPO)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit                  2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate  中文名：  分子式：C19H14F2O6 

人鐵蛋白(FE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human FE (Ferritin) ELISA Kit                 3,6'-Disinapoylsucrose  中文名：3,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19 

人特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名：  分子式：C19H16FNO
單胞菌通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-羥基-4-甲氧基肉桂酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口3-Hydroxy-4-methoxycinnamic 

CL-0047C6(大鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2吡嗪酰胺-d3質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Pyrazinamide-d3

CSAG1 Others Human 人 CSAGE / CSAG1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 地美環(huán)素質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Demeclocycline

小鼠腸微細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸地美環(huán)素半水化合物質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

293LVT人胚腎細(xì)胞--用于慢病毒包裝 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine乙基2-(6-氨基-2,3-)甘氨酸(阿那格雷雜質(zhì)A)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Ethyl 2-(6-Amino-2,3-dichlorobenzyl)glycine(Anagrelide Impurity A)
人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C鄰硝基本-α-D-葡萄糖苷shēng huà shì jì容量：100克

CMA1 Others Human 人 CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,4,6-三基本安 2,4,6-Trimqthylcnilinq 1988-2-1

草魚(yú)腎細(xì)胞;GIK鋅shēng huà shì jì容量：RT5克

T24細(xì)胞，膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 子宮高分化鱗癌細(xì)胞,HCC細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0908堿式碳酸鋅shēng huà shì jì容量：50毫升

615小鼠滑膜瘤株;ZM75566-99-92-2-Naphthaldehyde
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。