PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：剛地弓形蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Araliadiol  中文名：  分子式：C15H20O2    總基酸（T－AA）測試盒   The total amino acid (TAA) test kit

Antipyrine  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O    羥脯酸測試前處理試劑   Preeatme reage hydroxyproline test

Anthraquinone-2-carboxylic acid  中文名：蒽醌-2-羧酸  分子式：C15H8O4       Hydroxyproline (Hyp) test kit

Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽  分子式：C14H6Na2O8S2    羥脯酸（Hyp）測試盒   Glamine syhetase (GS) test kit              

Anthraquinone  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2    總堿度測定試劑盒   Total alkalinity determination kit
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid  中文名：氨噻肟酸  分子式：C6H7N3O3S  度：98.0%

兔子孕激素elisa試劑盒   兔子孕激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子孕激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子孕激素試劑盒、兔子孕激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Adipic dihydrazide  1071-93-8  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名：  分子式：C8H16O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Adrenosterone  中文名：腎上腺甾酮  分子式：C19H24O3 

兔子孕激素/孕(PROG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  1207441-49-3  中文名：  分子式：C29H46O3
剛地弓形蟲PCR檢測試劑盒說明書IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸伐昔洛韋水合物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Valacyclovir hydrochloride hydrate

A-375 [A375], 人惡性素瘤細(xì)胞株17-酮基維庫溴銨質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口17-Keto Vecuronium Bromide

NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-去乙酰基維庫溴銨質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口3-Desacetyl Vecuronium

大鼠腦平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL玉米素核苷同分質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Zeatin riboside mixed Isomers

B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞 B95-8 EBV conversion of leukocyte marmoset RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽酸多沙普侖質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Doxapram hydrochloride
人胚胎腸粘膜組織來源細(xì)胞;CCC-HIE-2液體生物防腐劑，英文名或英文縮寫：Proclin 300，級別：AR，99%，規(guī)格：25克

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 碳醋鉍;減式碳醋鉍;碳醋氧鉍;碳醋鉍 BisMuth subccronctq;BisMuth(III) ccronctq bcsic;BisMuth oxyccronctq 289-10-4

非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-磺酸，英文名或英文縮寫：Sulfamic acid，級別：BR，97%，規(guī)格：500克

CW-2細(xì)胞，人細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,A875細(xì)胞 人急性早幼粒細(xì)胞;HL-60PEPSTATIN胃蛋白酶抑制劑蛋白組學(xué)級25MG26305-03-3COLD

HCT-15(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(果膠酶Y-23)
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。