PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：蒼白密螺旋體螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Atorvastatin calcium  134523-03-8  中文名：阿托伐他汀鈣  分子式：C33H35FN2O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Aspirin  50-78-2  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4  度：99.0%      小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Aspergillon A  2239299-08-0  中文名：  分子式：C22H32O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Aspartame  22839-47-0  中文名：阿司帕坦  分子式：C14H18N2O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Artesunate  88495-63-0  中文名：青蒿琥酯  分子式：C19H28O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒      試劑盒   組裝/原裝
兔子組織因子(TF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Abiraterone acetate  154229-18-2  中文名：乙酸阿比特龍酯  分子式：C26H33NO2 

兔子組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid  10097-02-6  中文名：2,2-二羥甲基丁酸  分子式：C6H12O4  度：98.0%   

兔子組織型纖溶酶原激活劑elisa試劑盒   兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒、兔子組織型纖溶酶原激活劑eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Adenosine 5'-monophosphate  中文名：5'-腺嘌呤核苷酸  分子式：C10H14N5O7P 

兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Allopurinol  中文名：別嘌醇  分子式：C5H4N4O  度：98.0%

兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Nandrolone decanoate  360-70-3  中文名：癸酸諾龍  分子式：C28H44O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
蒼白密螺旋體螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格IL18 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-18 / IL-1F4 蛋白 (His 標(biāo)簽)聚乙二醇6000質(zhì)量規(guī)格：分子量5,000~7,000,分子生物學(xué)級(jí)PEG 6000

NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 WEHI 22.1(B細(xì)胞)吐溫20質(zhì)量規(guī)格：CPTween 20

CL-0305SF-295(人XG惡性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2曲拉通X-100質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)Triton X-100

PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-葡萄糖醛酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分D-Glucuronic acid

人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHCPEC NAL-別蘇氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL(+)-allo-Threonine
人晶狀體上皮細(xì)胞 (HLEpiC)( 5×105 ) HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞系 Human13-乙基-17-羥基-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(左炔諾孕酮雜質(zhì)B)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(Levonorgestrel Impurity B)

人細(xì)胞;C-33A17-去乙酰基諾孕酯質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口17-Desacetyl Norgestimate

人表皮色素細(xì)胞-深色素(HEM)( 5×105 )左西孟坦質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Levosimendan

rCF, 大鼠成纖維細(xì)胞利奈唑酮-d3質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Linezolid-d3

人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E 大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。