PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Aminophenazone  中文名：  分子式：C13H17N3O    脂褐質（不包括比色）檢測   Free fatty acids (NEFA) detection               

Ambroxol   中文名：鹽酸氨溴索  分子式：C13H19Br2ClN2O    組織因子   英文名稱：    tissue factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TF

Ambrisentan  中文名：安倍生坦  分子式：C22H22N2O4    組織因子抑制物   英文名稱：    tissue factor protein inhibitor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TFPⅠ

Altrenogest  中文名：烯丙孕素  分子式：C21H26O2    轉移生長因子-α   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TGF-α

alpha-Terthienylmethanol  中文名：  分子式：C13H10OS3    轉移生長因子-β1   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor β1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TGF-β1
兔子球蛋白M(IgM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  7-Methoxy-1-tetralinone  6836-19-7  中文名：  分子式：C11H12O2 

兔子球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene  2479-46-1  中文名：1,3-雙(4-氨苯氧基)苯  分子式：C18H16N2O2  度：98.0%   

兔子球蛋白Gelisa試劑盒   兔子球蛋白G試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子球蛋白G試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子球蛋白G試劑盒、兔子球蛋白G elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  8-Hydroxyodoroside A  176519-75-8  中文名：  分子式：C30H46O8  度：96.0%  關鍵詞：  夾竹桃; 強心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子球蛋白Gelisa試劑盒   兔子球蛋白G試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子球蛋白G試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子球蛋白G試劑盒、兔子球蛋白G elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal  59014-02-7  中文名：  分子式：C35H52O5  度：%  關鍵詞：  貫葉連翹; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  8-Phenyloctanoic acid  26547-51-3  中文名：8-苯基辛酸  分子式：C14H20O2
塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒直銷Ke-3 人細胞外消旋馬來酸噻嗎洛爾質量規(guī)格：美國進口rac Timolol Maleate

MDA-MB-436人腺癌細胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBS(R)-(+)-馬來酸噻嗎洛爾質量規(guī)格：美國進口(R)-(+)-Timolol Maleate

FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 標簽)(S)-(-)-馬來酸噻嗎洛爾質量規(guī)格：美國進口(S)-(-)-Timolol Maleate

小鼠雪旺細胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌細胞 Human替硝唑標記d4質量規(guī)格：美國進口Tinidazole Labeled d4

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1外消旋α-羥基布洛芬質量規(guī)格：美國進口rac α-Hydroxy Ibuprofen
大鼠癌細胞;SHZ-889-芴甲基-N-琥珀酰亞基碳酸酯，英文名或英文縮寫：FMOC-OSU，級別：BR，99%，規(guī)格：10克

BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細胞裂解液 (陽性對照) α-L-巖藻糖苷酶 α-L-Fucosidase (1.8u/mg) 9037-65-4 1U 通用試劑

人膀胱基質成纖維細胞總RNAHBdSF NA加醋-D FORMIC cCID C-D 917-71-2

ATF2 Others Human 人 ATF2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Chloroauricacidhydrated四水合錄金酸5毫克基準試劑，99.95%

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17(L-絲酸)
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。