小麥麩質(zhì)源性成分PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素

小麥麩質(zhì)源性成分PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

活化復(fù)制因子2抗體 ATF2
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體 AMPK beta 1
糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體 Amylin
血管緊張素Ⅱ抗體 Angiotensin II
血管緊張素Ⅱ受體1抗體 AT2R
血管生成素-1抗體 Angiopoietin-1
膜粘連蛋白5抗體 Annexin V
重組膜粘連蛋白5抗體 Annexin V
銜接蛋白α-Adaptin抗體 alpha Adaptin
凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端） APAF1(CT)
凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端） APAF1(NT)
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體 ABCG2
載脂蛋白E抗體 APOE
淀粉樣肽前體蛋白抗體 Amyloid Precursor Protein
水通道蛋白-2抗體 Aquaporin 2
血管緊張素原抗體 AGT
雄激素受體抗體 Androgen receptor
細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑) AVEN
軸蛋白1抗體 Axin1
自噬相關(guān)蛋白9B抗體 ATG9B
自噬相關(guān)蛋白12抗體 Apg12
自噬相關(guān)蛋白13抗體 ATG13
自噬相關(guān)蛋白3抗體 ATG3
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體 ADAMTS4
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Ser490/498)
磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757)